高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸附。流動相的正確配置對實驗數(shù)據(jù)和分離效果至關(guān)重要，它會直接影響樣品中組分的保留和轉(zhuǎn)移，從而對樣品的分離產(chǎn)生影響。因此，正確選擇和配置流動相是非常重要的。本期我們就來介紹一些流動相制備方面的技巧，以幫助大家獲得更優(yōu)異的分離效果和更準確的分析結(jié)果。

使用簡單的流動相

在HPLC分析中選擇簡單的流動相可以使方法更穩(wěn)定且易于轉(zhuǎn)移，同時在使用的過程中減少故障發(fā)生和停機。

基于重量比制備流動相

在流動相制備過程中，如果根據(jù)體積比(V/V)進行溶劑的混合，溶液體積可能會隨溫度的變化而變化，從而影響分離的準確性和重現(xiàn)性。因此最好根據(jù)重量比制備流動相，這樣即使環(huán)境條件發(fā)生變化，重量比也會保持一致。

對流動相組分分別混合

當我們根據(jù)體積比制備流動相時，應(yīng)該先按照相應(yīng)比例分別計算流動相中各溶劑的體積，然后進行混合。通常有兩種混合方式，如果先加入水，再加有機溶劑，混合溶劑的收縮會增加其濃度。如果先加入有機溶劑，再加入水，混合溶劑的收縮會降低其濃度。

使用預(yù)混合的流動相

使用預(yù)混合的流動相，這在反相色譜中比較常用，這種方式有助于避免混合過程中的溫度變化，提高混合效率，使其更有效地脫氣。

溶劑溫度校正

基于體積比制備流動相時，首先須將溶劑置于室溫條件下，確保體積的一致性和分析的重現(xiàn)性。這種可以通過將溶劑放入熱水或冷水浴中以調(diào)整溶劑溫度。

選擇正確的過濾裝置

在制備過程中過濾流動相時，選擇正確的過濾裝置是非常重要的。對于HPLC系統(tǒng)，建議使用孔徑為0.45µm或孔徑更小的濾膜；而對于UHPLC系統(tǒng)，濾膜孔徑應(yīng)小于等于0.22µm，這樣可以有效地去除流動相中的顆粒，防止系統(tǒng)堵塞。

推薦產(chǎn)品：

總而言之，選擇合適的制備流動相的溶劑與方式，才能確保良好的分離度和分析的重現(xiàn)性，為色譜工作者保駕護航。